Рейтинг:  0 / 5

Звезда неактивнаЗвезда неактивнаЗвезда неактивнаЗвезда неактивнаЗвезда неактивна
 

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12

 

<< Назад

 

Питательные среды

Агар Мюллера-Хинтона

1. Агар Мюллера-Хинтона следует готовить из сухой основы в соответствии с рекомендациями изготовителя. Среда должна быть такого качества, чтобы размеры контрольных зон для референс-штаммов соответствовали пределам, указанным в Приложении 2А. Очень важно в ходе приготовления не перегревать среду.

2. Среду остужают до 45-50°С и разливают по чашкам таким образом, чтобы толщина агарового слоя составляла приблизительно 4 мм. Для чашки Петри диаметром 90 мм требуется примерно 25 мл среды.

3. После застывания агара чашки, которые предполагается использовать немедленно, подсушивают в горизонтальном положении с закрытыми крышками в термостате при 37°С.

4. Чашки можно хранить в заклеенном пластиковом пакете в холодильнике (при +2...+8°С) до 2 недель.

5. Часть каждой партии чашек со средой контролируют на стерильность путем инкубации при 30-35°С

в течение 24 часов и более.

Диски с антибиотиками

Можно использовать любые производимые промышленно диски стандартного диаметра и соответствующей концентрации. Рабочий запас дисков с антибиотиками хранить при +2…8°С; для продления срока годности диски в заводской упаковке можно изначально хранить в морозильнике (лучше при -20°С). Упаковки дисков с бета-лактамными антибиотиками должны храниться замороженными, за исключением маленького рабочего запаса, который можно хранить в холодном месте максимум одну неделю.

После извлечения из холодильника, упаковка с дисками должна находиться при комнатной температуре в течение 1 ч, чтобы сравнялась температура. Такая процедура снижает объем конденсата, который образуется при контакте теплого воздуха с холодной упаковкой. При использовании дисков необходимо обращать внимание на количество антибиотика в диске, так как от этого зависит размер зоны задержки роста. В Приложениях 2-6 указаны обычно используемые количества антибиотиков для тестирования и соответствующие им зоны задержки роста. Например, если для тестирования энтеробактерий вместо обычного диска с 10 мкг гентамицина будет использован диск со 120 мкг этого антибиотика, интерпретация результатов может быть неправильной.

Кроме обычных дисков диаметром 6,35 мм могут быть использованы другие носители (например, Октодиски) или диски с нестандартным количеством антибиотика (см. ниже). В этом случае необходимо строго следовать указаниям производителя и применять соответствующие критерии для интерпретации получаемых результатов (см. Приложения 2-6).

Стандарт мутности для приготовления суспензии микроорганизмов

Обычно используют коммерческий стандарт мутности, соответствующий 0,5 единиц бариевого стандарта МакФарланда или эквивалентного латексного или стеклянного стандарта. Бариевый стандарт можно приготовить в лабораторных условиях следующим образом: в градуированный цилиндр емкостью 100 мл вносят 0,6 мл 1 %-го водного раствора хлорида бария дигидрата, доводят объем до 100 мл 1 %-м водным раствором серной кислоты. Тестирование стандарта мутности осуществляют с помощью фотометра в кюветах толщиной 1 см. При длине волны 625 нм величина экстинции для стандарта мутности в 0,5 единиц Мак-Фарланда должна быть 0,08-0,10. Стандарт мутности следует разлить в пробирки, идентичные тем, которые будут использоваться для образцов бульонной культуры. Их хранят плотно укупоренными при комнатной температуре в темноте не более 6 месяцев. Перед использованием пробирку со стандартом энергично встряхивают и визуально оценивают его гомогенность. Если появляются крупные неразбивающиеся частицы, стандарт должен быть заменен. Бариевые стандарты должны периодически заменяться и ежемесячно проверяться на соответствие оптической плотности.

 

Далее>>

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12

Все статьи